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土壤基因組DNA提取試劑盒提取的DNA可直接用于各種常規(guī)操作!

更新時間:2018-07-20      瀏覽次數(shù):1171

土壤基因組DNA提取試劑盒提取的DNA可直接用于各種常規(guī)操作!

 

產(chǎn)品簡介:

本試劑盒適合于從褐土、淤泥、火山灰等各種土壤環(huán)境中提取微生物DNA。對土壤中各種細(xì)菌、真菌有很好裂解效果,大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性。
本試劑盒采用我公司*的腐殖質(zhì)吸附材料,可專一的去除各種腐殖質(zhì)成分而絲毫不會影響DNA的產(chǎn)率,純度較酚、lv仿抽提法提高數(shù)倍。
使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR 、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實(shí)驗(yàn)。

 

 

 

操作步驟:

使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。

1、稱取土壤樣本0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成細(xì)粉末,加入450ul 溶液A 震蕩混勻。
* 也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管(建議使用 2ml 圓底管),加入 450ul 溶液A 劇烈震蕩混勻 1-2min 至沒有固體塊。 使用液氮研磨效果jia。

2、加入50ul 溶液B 充分顛倒混勻 (不要劇烈震蕩),65℃水浴6min,每2min充分顛倒混勻一次。

3、加入100ul 溶液C 充分顛倒混勻 (不要劇烈震蕩),12000rpm離心10min 。

4、將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管,12000rpm離心2min 。

5、在吸附柱中加入200ul 溶液D ,將離心后的上清加入到帶有溶液D 的吸附柱中,用移液器吹吸幾次混勻,12000rpm離心1min。

6、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱( 必須),12000rpm離心1min。

7、倒掉收集管中的廢液,在吸附柱中加入漂洗液500ul,12000rpm 離心1min。

8、倒掉收集管中的廢液,重復(fù)步驟7 兩次(共漂洗三次)。

9、倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管,12000rpm 離心2min 。

10、拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘( 因季節(jié)及氣候等因素不等),或50℃干燥1min。

11、將吸附柱放入一個新的離心管中,加入50-100ul 洗脫液(65 ℃預(yù)熱),12000rpm 離心1min。

12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,12000rpm 離心1min。離心管中即為土壤微生物DNA 溶液。

13、若產(chǎn)物PCR 效果差,可以適當(dāng)稀釋DNA 產(chǎn)物,或添加1/10 體積的PCR 增強(qiáng)劑。

 

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