產(chǎn)品分類
Products產(chǎn)品上新-人正常結(jié)腸上皮細胞
培養(yǎng)基 DMEM-H完全培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存。
生長條件 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形態(tài) 上皮細胞樣,多角形,不規(guī)則形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈,不產(chǎn)色素
細胞壁 分類在細菌、真菌、植物的生物,其組成的細胞都具有細胞壁(Cell Wall),而原生生物則有一部分的生物體具有此構(gòu)造,但是動物沒有。 植物細胞壁主要成分是纖維素,經(jīng)過有系統(tǒng)的編織形成網(wǎng)狀的外壁。可分為中膠層、初生細胞壁、次生細胞壁。中膠層是植物細胞剛分裂完成的子細胞之間,最先形成的間隔,主要成分是果膠質(zhì)(一種多糖類),隨后在中膠層兩側(cè)形成初生細胞壁,初生細胞壁主要由果膠質(zhì)、木質(zhì)素和少量的蛋白質(zhì)構(gòu)成。次生細胞壁主要由纖維素組成的纖維排列而成,如同一條一條的線以接近直角的方式排列,再以木質(zhì)素等多糖類黏接。 真菌細胞壁則是由幾丁質(zhì)、纖維素等多糖類組成,其中幾丁質(zhì)是含有碳水化合物和氨,性柔軟,有彈性,與鈣鹽混雜則硬化,形成節(jié)肢動物的外骨骼。幾丁質(zhì)不溶于水、酒精、弱酸和弱堿等液體,有保護功能。 細菌細胞壁組成以肽聚糖為主。