產(chǎn)品分類
Products信帆告訴您魚類甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒的性能特點
本試劑盒含量是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系
常見的問題:
問題1:如果我們代測的樣本是組織樣本,請問應(yīng)該選用什么來組織勻漿,濃度是多少? | |||||||
答:一般我們試劑盒的組織勻漿,都是按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液可以選取生理鹽水,也可以選取PBS,但是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol. | |||||||
問題2:請問試劑盒在zui后計算的時候,用一般試劑盒測要測組織蛋白濃度,zui后計算出來的,我們的試劑盒是不是也需要這樣操作?具體怎么計算? | |||||||
答:對于組織樣本來講,我們建議做蛋白定量.然后把測得的結(jié)果比上蛋白定量的結(jié)果,zui終得到每g蛋白中含有指標的量,這樣更為準確!如果不做蛋白定量的話,就是得到每g組織中含有量! | |||||||
問題3:請問我訂購了你們的試劑盒,但是樣本是分批次收集的,我可以分批次實驗嗎。 | |||||||
答:可以的,我們的試劑盒橫條是可拆卸的,試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,下次可以繼續(xù)使用,但是建議是拆封之后一個月內(nèi)用完。 | |||||||
問題4:請問各種標本的處理方式,你可以發(fā)給我一下嗎? 信帆告訴您魚類甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒的性能特點 | |||||||
答:當然可以。標本要求如下: | |||||||
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。標本?yīng)避免反復(fù)凍融。 | |||||||
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。 | |||||||
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 | |||||||
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。 | |||||||
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參? 照此實行。 | |||||||
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。 | |||||||
5.培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 | |||||||
6.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 | |||||||
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融. | |||||||
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 信帆告訴您魚類甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒的性能特點 |