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為什么DMEM培養(yǎng)基是鮮紅色的

更新時(shí)間:2020-08-11      瀏覽次數(shù):13302

1. 為什么這個(gè)DMEM培養(yǎng)基是鮮紅色的?

培養(yǎng)基的顏色主要是酚紅來(lái)顯示的,酚紅指示顏色非常靈敏,p值范圍為6-8,顏色由黃變?yōu)樽霞t。酚紅不是必須的,在有些情況下甚至是多余的,酚紅有類似固醇類激素的作用,如果涉及到固醇類激素相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng),盡量不要添加。但是為了培養(yǎng)方便,能讓我們直觀地感覺培養(yǎng)液的狀況,加入酚紅后,如果培養(yǎng)液偏酸了,就顯示偏黃色,偏堿性了就顯示偏紫色。

2. 為什么培養(yǎng)皿放在一個(gè)沒有開啟CO2的孵箱里面,培養(yǎng)液顏色偏紫色?
一般的DMEM使用的緩沖體系是NaHCO3, 初中的時(shí)候應(yīng)該見過如下的方

2NaHCO3=Na2CO3+CO2+H2O

在沒有CO2的孵箱中,培養(yǎng)液中的CO2一直溢出,碳酸變少了,溶液變堿性了,就偏紫色了。 同時(shí)我們打開了很久的DMEM瓶里面的培養(yǎng)液也會(huì)慢慢偏紫色,也就是這個(gè)道理。

3. 什么時(shí)候溶液會(huì)變?yōu)辄S色?
一般污染細(xì)菌的時(shí)候或者長(zhǎng)時(shí)間不換液,溶液變?yōu)辄S色主要是酸性物質(zhì)太多,細(xì)菌和細(xì)胞過度增長(zhǎng)都會(huì)產(chǎn)生酸性物質(zhì),溶液會(huì)變?yōu)辄S色。

4. 培養(yǎng)基偏紫色了還能用不?
可以將該偏紫色的培養(yǎng)基置于CO2孵箱中,擰松瓶蓋。一段時(shí)間之后你會(huì)發(fā)現(xiàn)顏色變?yōu)轷r紅色了,那么可以繼續(xù)接著用。但是不要使用過長(zhǎng)時(shí)間未用完并且變色的培養(yǎng)液,置于空氣下氧化之后培養(yǎng)基成分可能已發(fā)生了變化。

5. 哪些情況下不得使用酚紅?
如前面所說的酚紅有類似固醇類激素的作用,如果涉及到固醇類激素相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng),不要添加。另外在做流式細(xì)胞的時(shí)候,酚紅會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響,因此也不要添加。

6. 有沒有不受CO2影響的培養(yǎng)基?
有,如果緩沖體系不是NaHCO3,而是其他體系如HEPES,就不受CO2的影響。

7. 常用的培養(yǎng)基有哪些?
MEM(Minimum Essential Medium): 也稱低必須培養(yǎng)基,它僅含有12種必須氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素??梢詮V泛應(yīng)用到各種細(xì)胞培養(yǎng)。

DMEM:分為高糖和低糖,碳酸氫鈉緩沖體系,所以需要CO2。
高糖的適合于高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的細(xì)胞。 低糖的適合于生長(zhǎng)速度較快,附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。

DMEM/F12:F12 培養(yǎng)基成分復(fù)雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結(jié)合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無(wú)血清配方的基礎(chǔ),以利用F12含有較豐富成分和DMEM含有較高濃度的營(yíng)養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較條件下哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

RPMI-1640:主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),廣泛用于哺乳物,特殊造血細(xì)胞,正?;蛘邜盒栽錾陌准?xì)胞,雜交瘤細(xì)胞。 另外K-562, L-60、urkat、IM-9 等淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞也可以使用。

McCoy’s 5A : 主要用于肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng), 還可以用于骨髓、皮膚、肺等原代培養(yǎng),用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)支持。比如HT29,BHL100等上皮細(xì)胞。

IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium):主要用于紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體培養(yǎng)。培養(yǎng)液中含有微量元素硒以及額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉以及HEPES。

M199 Medium 是具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液,主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)必須輔助血清才能長(zhǎng)期培養(yǎng)。

L-15(Leibovitz Medium) 適用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株,用于快速增值瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。

Ham’s F-10: 適用于小鼠細(xì)胞以及人的二倍體細(xì)胞的培養(yǎng)

Ham’s F-12: 適用于單細(xì)胞培養(yǎng)或者克隆培養(yǎng), 是無(wú)血清培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

MCDB131: 適用于培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞。

Opti-MEM I Reduced Serum Media: 適用于培養(yǎng)造血細(xì)胞。