臺(tái)盼藍(lán)染色液*

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。
臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較準(zhǔn)確的定量。染色時(shí)間只需3-5分鐘，操作簡(jiǎn)單。

別名 臺(tái)盼藍(lán)
英文名稱 Trypan Blue Stain solution,0.4%
CAS 72-57-1
分子式 C34H24N6O14S4Na4
分子量 960.81
儲(chǔ)存條件 2-8℃，有效期1年
 

使用說(shuō)明：
1. 收集細(xì)胞：
用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞可直接收集。收集細(xì)胞時(shí)用 1000-2000 rpm 離心 1
分鐘，棄上清，制備單細(xì)胞懸液，并做適當(dāng)稀釋。
2. 臺(tái)盼藍(lán)染色：
細(xì)胞懸液與 0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以 9:1 比例混勻（終濃度 0.04%），染色 3 分鐘 ( 染色 3 分鐘時(shí)間
已經(jīng)足夠，但染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些，但不宜超過(guò) 10 分鐘) 。
3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：
吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大，無(wú)光澤；活細(xì)胞不著
色并保持正常形態(tài)，有光澤。通常要比較準(zhǔn)確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù) 500 個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞存活率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100%
 

注意事項(xiàng)：
1. 染色時(shí)間不能太長(zhǎng)，否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色，使檢測(cè)結(jié)果偏低。
2. 染色前染液若有沉淀，需過(guò)濾除掉沉淀后再用。
3. 有潛在致癌危險(xiǎn)，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

臺(tái)盼藍(lán)染色液原來(lái)也叫錐蟲藍(lán)染色液