GUS染色試劑盒可配置多少染色液

GUS染色試劑盒 (GUS Staining Kit) 采用經(jīng)典的組織化學(xué)方法，通過(guò)與底物的顏色反應(yīng)來(lái)對(duì)植物中g(shù)us基因融合標(biāo)記進(jìn)行快速檢測(cè)。

gus基因存在于大腸桿菌E.coli等一些細(xì)菌基因組內(nèi)，其表達(dá)產(chǎn)物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS，β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶)是一種水解酶，能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質(zhì)的水解。因?yàn)榻^大多數(shù)植物細(xì)胞內(nèi)不存在β-葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此gus基因是轉(zhuǎn)基因植物常用的報(bào)告基因之一，尤其是在研究外源基因瞬時(shí)表達(dá)的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。

β-葡萄糖苷酸酶可以將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X-Gluc）分解為藍(lán)色的不溶物質(zhì)，因此用含有X-Gluc底物的染色液浸泡轉(zhuǎn)gus基因植物，具有GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)，可用肉眼或顯微鏡觀察到。其檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏、穩(wěn)定，且背景活性低。

本試劑盒包含GUS染色的全部試劑，使用方便，只需將配制好的X-Gluc溶液和染色緩沖液按照比例混合即配成GUS染色液。該試劑盒可以配制50ml的GUS染色液。

保存條件：

1.X-Gluc -20℃避光保存，X-Gluc溶解液室溫保存，GUS染色緩沖液4℃保存。未配制的試劑盒按照溫度貯存，有效期2年。

2.配制好的X-Gluc溶液(50×) -20℃避光保存30天，長(zhǎng)期-80℃保存。

注意事項(xiàng)：

1.GUS染色工作液好現(xiàn)用現(xiàn)配，短期貯存可以-20℃保存2-3天。

2.X-Gluc溶液(50×) 應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則染色效率會(huì)下降，因此建議按照單次使用量分裝貯存。

3.由于植物組織特異性等原因，藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不*相同，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況摸索具體的實(shí)驗(yàn)條件，調(diào)整樣品制備方法和染色時(shí)間。對(duì)于擬南芥的根、花、葉片，以及煙草幼苗的根就可以不做任何預(yù)處理而直接染色。但是對(duì)于煙草和馬鈴薯的莖和葉就必須先剪切成薄片（約1-3mm）再進(jìn)行染色。當(dāng)操作更大的組織樣品時(shí)，可以選用真空滲透法來(lái)促進(jìn)染色工作液滲入細(xì)胞。

4.為了您的安全和健康，操作時(shí)請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。